人胚胎干细胞来源红系细胞膜蛋白表达的研究

作者：李晴; 邹庆; 毛斌; 黄淑; 赖默温; 潘旭; 孙文翠; 陈谊金; 刘嘉馨; 马峰

来源：中国输血杂志, 2017, 30(03): 235-241.

DOI：10.13303/j.cjbt.issn.1004-549x.2017.03.006

• 人胚胎干细胞
• 红系细胞
• 膜蛋白表达
• 红系爆发式集落形成单位
• 带3蛋白

目的探讨人胚胎干细胞(h ESCs)来源红系细胞在发育过程中其膜蛋白,包括膜表型分子、膜骨架蛋白和跨膜蛋白的表达情况。方法 h ESCs与小鼠主动脉-性腺-中肾(m AGM-S3)基质细胞共培养产生造血干祖细胞(CD34+CD45+)和GPA+细胞,挑取共培养12 d的细胞,同时磁珠分选人脐血中的CD34+细胞,在多种特定细胞因子SCF、IL-6、IL-3、FLT3-L、TPO、EPO等诱导下,分别进行集落培养12-14 d产生红系爆发式集落形成单位(BFU-E),运用流式细胞术(FACs)、qRT-PCR和免疫荧光染色等方法检测并比较hESCs和人脐血CD34+细胞2种来源的红系细胞膜蛋白的表达情况,并以后者作为对照组。结果 hESCs来源BFU-E的膜蛋白的表达趋势与对照组相近:其膜骨架蛋白和跨膜蛋白的基因,如SPTA、SPTB、ANK1、EPB41等基因转录水平都在逐渐增强,而一些膜蛋白如黏附分子CD49d、CD29、CD71等的表达逐渐降低,CD47基本不表达;带3蛋白(Band 3)表达量较高且与成体型血红蛋白β-globin的表达呈正相关。结论在hESCs向红系诱导生成过程中,一些膜表型分子表达在逐渐降低,而膜蛋白表达逐渐增强。

• 单位
  中国医学科学院北京协和医学院; 四川新生命干细胞科技股份有限公司; 中国医学科学院输血研究所