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摘要
<正>吸烟是COPD的主要致病因素,气道重塑是COPD患者出现持续气流受限的主要病理基础。尼古丁占烟草生物碱总量的95%以上,尼古丁对COPD发病,特别是对气道重塑有着重要影响。我们以原代培养的人气道上皮下成纤维细胞为研究对象,观察尼古丁对成纤维细胞向肌成纤维细胞转分化的影响,以探讨尼古丁在COPD气道重塑中的作用。材料与方法癌周正常肺组织取自广州医学院第一附属医院胸外科2010年1—6月手术治疗的40～60岁肺癌患者,进行细胞原代培养及鉴定,分离正常支气管组织后用酶消化法及差速贴壁法获得支气管成纤维细胞,用含有100 U/L青霉素、100 mg/L链霉素和10%胎牛血清的DMEM/F12培养基,置于95%空气、5%CO2和37℃孵育箱中常规培养及传代。通过观察细胞形态及细胞免疫荧光对细胞进行鉴定,一抗（小鼠抗人波形蛋白单克隆抗体）和二抗[四甲基异硫氰酸罗丹明（TR）标记的山羊抗小鼠IgG]均为美国Santa Cruz公司产品,4,6-二脒基-2-苯基吲哚复染。
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单位广州医学院/第一附属医院; 呼吸疾病国家重点实验室; 广州医学院第一附属医院
