TRAIL基因通过PI3K/Akt信号通路抑制LPS诱导的A549凋亡和炎症反应

作者：陈静; 王栋宇; 何萌萌; 管洁

来源：中国老年学杂志, 2023, 43(12): 3032-3036.

• TRAIL基因
• 肺泡上皮细胞(A549)
• 炎症反应
• 急性肺损伤
• PI3K/Akt信号通路

目的 探讨过表达肿瘤坏死因子凋亡相关诱导配体(TRAIL)基因对脂多糖(LPS)诱导的人肺泡Ⅱ型上皮细胞(A549)凋亡和炎症反应的影响及可能的机制。方法 采用LPS处理A549构建急性肺损伤(ALI)体外细胞模型，实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)和Western印迹测定TRAIL的表达变化。在A549中转染TRAIL-pcDNA3.1过表达载体质粒，RT-qPCR和Western印迹检测LPS诱导条件下的转染效果，CCK-8实验检测细胞活性，流式细胞术测定凋亡变化，Western印迹检测细胞中活化的半胱天冬酶(Cleaved Caspase)-3和Cleaved Caspase-9表达水平及磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)和蛋白激酶B(Akt)的磷酸化水平，酶联免疫吸附试验(ELISA)检测肿瘤坏死因子(TNF)-α、细胞间黏附分子(ICAM)-1和白细胞介素(IL)-8的含量。结果 TRAIL mRNA和蛋白及A549活性在LPS处理后显著降低(P<0.05),A549凋亡率、Cleaved Caspase-3和Cleaved Caspase-9表达、p-PI3K和p-Akt水平及TNF-α、ICAM-1和IL-8含量均显著升高(P<0.05)。过表达TRAIL能够明显提高LPS诱导的A549活性，明显降低LPS诱导的细胞凋亡率、Cleaved Caspase-3和Cleaved Caspase-9表达、p-PI3K和p-Akt水平及TNF-α、ICAM-1和IL-8含量(P<0.05)。结论 过表达TRAIL基因可降低LPS诱导的A549凋亡及炎症反应，其作用机制可能与阻断PI3K/Akt信号通路有关。