重组载体免疫小鼠制备抗人CD33单克隆抗体

作者：王卉; 刘红芹; 王爱先; 甄军毅; 吴雪英; 陈曼; 宫美维; 屈浩; 周珊; 陶欣勇; 廖晓龙^*

来源：细胞与分子免疫学杂志, 2020, 36(02): 169-174.

DOI：10.13423/j.cnki.cjcmi.008944

• CD33
• 基因免疫
• 单克隆抗体(mAb)
• 流式细胞术

目的利用基因免疫方法制备抗人CD33单克隆抗体(mAb),并对抗体的特性及临床应用进行初步研究。方法真核载体pcDNA3.1(+)/CD33免疫小鼠,通过杂交瘤技术制备抗人CD33 mAb,并进行性能评价和临床验证。结果成功获得1株分泌小鼠抗人CD33单克隆抗体的杂交瘤细胞株,克隆号命名为HI33a,抗体亚类为IgG2a,κ。流式细胞术检测其可与髓系细胞系反应,不与淋巴系细胞系反应;可完全抑制同类进口抗体与HL-60细胞的结合。Western blot证实可识别相对分子量(Mr)为67 000的HL-60细胞膜蛋白(符合CD33蛋白分子的特征)。标记藻红蛋白(PE)后,作为抗体试剂与进口试剂对比,准确度、线性、精密度等评估均符合行业标准。558例临床骨髓样本检测结果与对比试剂高度一致。结论制备了可持续分泌抗人CD33 mAb的杂交瘤细胞株。