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摘要
以r Protein A-琼脂糖凝胶为载体,同时偶联抗黄曲霉素B1(AFB1)、玉米赤霉烯酮(ZEN)和脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)单抗,制备了AFB1-ZEN-DON三合一免疫亲和柱,并对非特异性吸附、柱空白、柱容量、柱效及样品加标回收率等指标进行评价。结果表明,0.25 m L胶对应的柱容量分别为:AFB1295 ng,ZEN 905ng,DON 2342 ng;柱空白为0;r Protein A-琼脂糖凝胶(0.25 m L胶)对3种毒素的非特异吸附率均低于8%,3种毒素不同浓度的平均柱回收分别为97.4%、98.0%和98.4%。通过优化条件,选择80%甲醇-水(80∶20,V/V)为提取溶剂,PBST稀释;FAPAS质控样本经不同批次三合一亲和柱净化后测定结果接近靶心值。制备的三合一免疫亲和柱能满足食品及饲料样品的前处理,可替代常规单一亲和柱,为多种毒素的一步富集、净化、检测奠定基础。
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单位南京财经大学; 江苏省苏微微生物研究有限公司
