摘要
目的:探究红景清肺方对大气细颗粒物(Particulata Matter 2.5, PM2.5)诱导小鼠肺损伤的保护作用及机制。方法:40只ICR雄性小鼠,随机分为空白对照组、PM2.5模型组、中药等效组、中药二倍组。中药各组预给药7 d后,除空白对照组外,各组持续2 d给予0.02 mg·μL-1浓度PM2.5混悬液滴鼻制备小鼠肺损伤模型。末次染毒24 h后取肺组织样本,苏木素-伊红(Hematoxylin-eosin, HE)染色观察肺组织形态学变化;酶联免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay, ELISA)检测三磷酸腺苷(Adenosine triphosphate, ATP)和Na+-K+-ATP酶(Na+-K+-ATPase)、Ca2+-Mg2+-ATP酶(Ca2+-Mg2+-ATPase)含量;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测腺苷酸活化蛋白激酶(AMP-activatedproteinkinase, AMPK)、过氧化物酶体增殖物激活受体1α(peroxisome proliferator-activated receptor-γcoactivator 1α,PGC-1α)及线粒体转录因子A(mitochondrial transcription factor A,TFAM)蛋白表达水平;免疫组织化学法(immunohistochemistyr, IHC)检测PGC-1α、TFAM、核呼吸因子1(nuclear respiratory factor-1,Nrf1)蛋白表达。结果:与空白对照组比较,PM2.5模型组小鼠肺组织结构病理损伤明显,肺组织中ATP、Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶含量显著降低(P<0.01),AMPK、PGC-1α、TFAM蛋白表达水平及PGC-1α、Nrf1、TFAM蛋白阳性表达率明显降低(P<0.01);与PM2.5模型组比较,中药各组肺组织损伤明显改善,中药二倍组中ATP含量升高(P<0.05),Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶含量显著升高(P<0.01),中药等效组三者含量有上升趋势,但差异无统计学意义(P>0.05),中药各组AMPK、PGC-1α、TFAM蛋白表达水平及PGC-1α、Nrf1、TFAM蛋白阳性表达率显著升高(P<0.01)。结论:红景清肺方可提高肺组织内Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶活性,上调AMPK/PGC-1α信号通路蛋白水平,减轻线粒体损伤和功能障碍,促进线粒体生物合成,有效改善肺组织能量代谢,从而减轻PM2.5对肺组织的损伤。
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