人胎盘绒毛膜间充质干细胞分离培养方法研究

作者：陈凤; 卿玲; 崔璐; 王淼; 王菲^*

来源：重庆医学, 2022, 51(01): 122-126.

DOI：10.3969/j.issn.1671-8348.2022.01.027

• 胎盘绒毛膜间充质干细胞
• 组织块贴壁
• 胶原酶
• 胰酶
• 生物学特性

目的比较不同方法分离培养人胎盘绒毛膜间充质干细胞(MSC)的差异,并鉴定其生物学特性。方法选取健康孕妇胎盘绒毛膜组织分别采用组织块贴壁法、胶原酶消化法、胰酶消化法进行分离培养,流式细胞仪分析细胞表面标志物的表达,台盼蓝染色计数方法绘制细胞生长曲线并计算群体倍增时间,逆转录聚合酶链反应和成脂诱导分化试剂盒分别检测细胞多能性相关基因及分化潜能。结果胶原酶消化法原代培养周期均明显短于组织块贴壁法和胰酶消化法,培养相同时间内获得的活细胞数量均明显高于组织块贴壁法和胰酶消化法,差异均有统计学意义(P<0.05);3种方法来源细胞均表达MSC表面标志物——CD44、CD105,不表达造血细胞表面标志物——CD34、CD45;3种方法来源细胞生长曲线均呈"S"形,第4代细胞群体倍增时间比较,差异均无统计学意义(P>0.05);3种方法获得细胞均表达多能性相关基因——Oct4、Nanog,且具有成脂分化能力。结论组织块贴壁法、胶原酶消化法、胰酶消化法均可分离培养获得绒毛膜MSC,但结合培养时间及细胞纯度等因素认为,胶原酶消化法更具有优势。

• 单位
  深圳市第三人民医院; 中山大学