摘要
目的探讨肾疏宁干预乙型肝炎病毒(HBV)诱导人肾小管上皮细胞(HK-2)转分化,延缓肾间质纤维化作用的可能机制。方法通过75只C57BL/6小鼠的中药肾疏宁灌胃,制备含药血清;使用Lipofectamine转染HBV至HK-2的方法造模;将细胞分为:空白血清对照组、空质粒组、HBV组、贝那普利组、肾疏宁低浓度组、肾疏宁中浓度组、肾疏宁高浓度组。运用酶联免疫吸附实验(ELISA)、实时荧光定量PCR法、蛋白质印迹(Western blot)法检测HK-2细胞中HBsAg、HBeAg、TGF-β1、p-Smad2、p-Smad3、Smad7、Col-Ⅲ、ColⅣ、FN的表达。结果 ELISA检测结果:HBV组与空质粒组比较,HBsAg、HBeAg、TGF-β1表达上调(P<0.01);与HBV组比较,贝那普利组、肾疏宁低浓度组、肾疏宁中浓度组、肾疏宁高浓度组TGF-β1蛋白表达下降(P<0.001);与贝那普利组比较,肾疏宁低浓度组TGF-β1的表达相对较高(P<0.05)。实时荧光定量PCR检测结果:与HBV组比较,贝那普利组、肾疏宁各干预组ColⅢ、Col-Ⅳ、FN mRNA表达明显下降(P<0.001)。Western blot检测结果:与HBV组比较,贝那普利组、肾疏宁各干预组p-Smad2、p-Smad3蛋白表达明显下降(P<0.001)。结论肾疏宁可通过干预TGF-β1/Smad信号通路减轻HBV诱导的人肾小管上皮细胞转分化,并减轻细胞外基质的沉积,从而延缓纤维化的进程。
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单位天津中医药大学第一附属医院; 天津中医药大学