巴比妥单克隆抗体制备及其免疫学特性鉴定

作者：胡刚; 陈连康; 胡小龙; 陈复华; 胡晶英; 曹芳琦; 曾立波

来源：中国法医学杂志, 2013, (03): 177-180.

DOI：10.13618/j.issn.1001-5728.2013.03.001

• 法医毒物分析
• 巴比妥
• 半抗原
• 完全抗原
• 单克隆抗体
• 免疫学特性 forensic toxicological analysis
• Barbital
• hapten
• complete antigen
• monoclonal antibody
• Immunological characteristics

目的建立抗巴比妥单克隆抗体杂交瘤细胞株,制备抗巴比妥单克隆抗体,并对其免疫学特性进行鉴定。方法将巴比妥分子环状丙二酰脲环上氨基引入活性羧基,然后通过缩合反应分别与匙孔血蓝蛋白(KLH)和牛血清白蛋白(BSA)偶联,得到完全抗原BAR-KLH和BAR-BSA,并用紫外分光光度计鉴定。用BAR-KLH免疫Balb/C小鼠,利用细胞融合技术建立稳定分泌抗巴比妥单克隆抗体的杂交瘤细胞株;采用体内诱生腹水法制备巴比妥单克隆抗体,饱和硫酸铵法、亲和层析法纯化,并进行免疫学特性鉴定。结果完全抗原偶联成功,其偶联率为30∶1;筛选出1株杂交瘤细胞命名为5C6,其产生的单抗效价为1∶6.4×104,属于IgG1...

• 单位
  上海医药工业研究院; 上海市公安局物证鉴定中心; 中国医药工业研究总院