小麦基因组原位杂交技术的影响因素分析

作者：王小利; 王军卫

来源：实验技术与管理, 2013, (03): 39-43.

DOI：10.16791/j.cnki.sjg.2013.03.011

• 小麦基因组原位杂交
• 影响因素
• 切口平移法 wheat
• genome in situ hybridization(GISH)
• influencing factor

采用切口平移法标记外源物种(黑麦)总基因组DNA作为探针,用受体物种总基因组DNA(中国春小麦)作遮盖,对小麦1B/1R易位系中外源染色体的黑麦易位片段进行检测。对影响基因组原位杂交技术实验效果的因素进行了分析。通过实验认为:细胞分裂相多、染色体分散良好、染色体长度适中的高质量染色体制片是取得理想实验效果的基础;保证在整个实验过程中染色体一直附着在载玻片上不丢失是实验进行的支撑条件;探针DNA与封阻DNA的比例是取得理想实验效果的关键。对杂交信号过多或过少或者无杂交信号的技术环节进行了分析,并提出了解决办法。实验过程中应严格控制每一步骤,才能获得理想的原位杂交实验效果。

• 单位
  西北农林科技大学