摘要

目的比较用不同的方法脱细胞处理异种(猪)角膜基质制备组织工程角膜支架材料,并对其生物相容性进行研究。方法成年York猪角膜基质材料,以Triton联合0.25%胰酶,处理30min~3h为材料1;Triton联合DNA-RNA酶,处理8~14h为材料2;Triton联合0.25%胰酶、DNA-RNA酶,处理3~5h为材料3。3种材料用无水氯化钙脱水干燥保存。在材料上接种兔角膜基质成纤维细胞,观察细胞生长情况。新西兰大白兔24只,随机分为3组,每组8只。右眼为实验眼,左眼为空白对照眼。将材料植入兔眼角膜基质层中,术后每日裂隙灯检查术眼;1、4、8和12周分别随机取2只兔眼角膜作HE染色,观察材料的生物相容性。结果材料1、2细胞脱出不完全,处理最佳时间分别是2h和10~12h,角膜基质网状间隙无明显增大;接种兔角膜基质成纤维细胞后,3~4d细胞死亡;植入兔角膜基质中有明显的免疫排斥反应。材料3脱出细胞完全,其脱细胞处理的最佳时间为4h,角膜基质纤维结构无破坏,呈三维网状结构,网状间隙明显增大;接种兔角膜基质成纤维细胞后,细胞在材料上贴附生长良好;将其植入兔角膜基质中无炎性及排斥反应,可逐渐降解吸收,有良好的生物相容性。结论Triton联合0.25%胰酶、DNA-RNA酶法处理的异种(猪)角膜基质具有良好的生物相容性,可作为一种组织工程角膜的支架材料。

  • 单位
    第四军医大学; 西京医院