H6N6亚型禽流感病毒感染RAW264.7细胞炎症模型的建立

作者：杨鑫; 王建俊; 徐浩; 李俊贤; 任涛; 欧德渊^*

来源：经济动物学报, 2023, 1-10.

• H6N6亚型禽流感病毒
• RAW264.7
• 炎症
• 模型

探讨H6N6亚型禽流感（H6N6）的感染量、感染时间与被感染RAW264.7细胞炎性水平动态变化的相关性，为建立RAW264.7细胞体外炎症模型提供参考依据。根据Reed和Muench法计算病毒滴度（TCID50），以100TCID50的H6N6亚型禽流感病毒感染RAW264.7细胞，感染作用2 h，弃病毒液，加入含5% FBS的DMEM培养液继续培养，分别于第12、24和48 h收集培养物上清液或细胞，CCK8测定细胞活力；透射电镜检测细胞超微结构；ELISA检测小鼠白介素1β（IL-1β）、小鼠白介素2（IL-2）、小鼠白介素6（IL-6）和小鼠肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的含量；qRT-PCR检测IL-1β、IL-2、IL-4、IL-6和TNF-α mRNA表达水平。结果显示，经H6N6感染各时间段细胞活力显著下降（P<0.01），细胞中线粒体肿胀，自噬体增多，IL-1β、IL-2、IL-6和TNF-α含量显著升高（P<0.01），IL-1β、IL-2、IL-4、IL-6和TNF-α mRNA表达水平显著升高（P<0.01），感染24 h达到最高。结果表明，成功构建类H6N6流感病毒体外感染RAW264.7细胞模型，拟为进一步研究其致病机制提供了条件。

• 单位
  贵州大学; 动物科学学院