糖酵解关键酶PFKFB3对婴幼儿血管瘤内皮细胞增殖、迁移及凋亡的影响

作者：杨开颖; 龚雪; 邱桐; 周江元; 兰钰茹; 吉毅^*

来源：中华皮肤科杂志, 2023, 56(04).

• 血管瘤
• 血管瘤内皮细胞
• 糖酵解
• 细胞增殖
• 细胞凋亡
• 细胞迁移
• 6磷酸果糖2激酶/果糖-2, 6-二磷酸酶3

目的研究糖酵解关键酶6-磷酸果糖-2-激酶/果糖-2, 6-二磷酸酶3(PFKFB3)对婴幼儿血管瘤(IH)内皮细胞(HemEC)生物活性的影响。方法收集4例增殖期及4例消退期IH组织, 从增殖期IH组织中提取原代HemEC, 以脐静脉内皮细胞(HUVEC)为对照。通过免疫组化与Western印迹法分别检测PFKFB3在IH组织与HemEC中的表达水平。采用CCK8实验检测0 ～ 10 μmol/L PFKFB3特异性抑制剂PFK15对HemEC细胞增殖的影响。体外培养HemEC, 采用5 μmol/L PFK15干预细胞, 采用Transwell法观察HemEC迁移能力, 流式细胞仪检测HemEC凋亡水平。组间比较采用t检验或方差分析。结果免疫组化显示, 增殖期IH组织中PFKFB3表达丰度(74.34% ± 5.26%)高于消退期(41.46% ± 2.99%, t = 9.40, P < 0.001)。Western印迹显示, HemEC中PFKFB3相对表达水平(0.73 ± 0.05)高于HUVEC(0.45 ± 0.04, t = 8.50, P < 0.001)。CCK8实验结果显示, 0.625、1.25、2.5、5、10 μmol/L PFK15组HemEC增殖活性均低于对照组(均P < 0.01)。Transwell实验显示, PFK15干预组HemEC迁移数(297 ± 15)低于对照组(422 ± 8, t = 12.59, P < 0.001)。流式细胞仪检测显示, PFK15干预组HemEC凋亡率(6.69% ± 0.64%)高于对照组(0.34% ± 0.07%, t = 17.07, P < 0.001)。结论糖酵解关键酶PFKFB3在IH增殖期组织与HemEC中高表达, PFKFB3抑制剂PFK15可抑制HemEC增殖、迁移并促进其凋亡。

• 单位
  四川大学华西医院