摘要
目的 探究象皮生肌膏对大鼠肛瘘切除术后创面模型的治疗作用及其与磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(Phosphoinosi-tide 3-kinase/proteinkinase B,PI3K/Akt)信号通路的相关性。方法 将36只SPF级健康成年雄性SD大鼠按照随机数字表法分为假手术组、模型组、象皮生肌膏组、湿润烧伤膏组,每组各9只。除假手术组外均采用0号钢丝(Aciflex)制成人造肛瘘,随后进行肛瘘切除术,创面不缝合,保持开放,使之形成一个“急性、开放、渗血”的类似临床肛瘘术后创面,并予以相应药物肛周换药10 d,模型组予以灭菌注射用水换药。利用常规面积检测法比较模型组、象皮生肌膏组、湿润烧伤膏组各组大鼠肛瘘术后创面的创面愈合率;苏木精-伊红(Hematoxylin-eosin staining, HE)染色观察各组大鼠肛周组织病理情况;蛋白免疫印迹法(Western blot, WB)比较各组大鼠肛周肉芽组织中白介素17(Interleukin 17,IL-17)、磷脂酰肌醇3-激酶(Phosphoinositide 3-kinase, PI3K)、蛋白激酶B(Proteinkinase B,Akt)、磷酸化PI3K(Phospho-PI3K,p-PI3K)、磷酸化Akt(Phospho-AKT,p-AKT)蛋白表达水平;定量实时聚合酶链锁反应(Quantitative real time polymerase chain reaction, Q-PCR)检测各组大鼠肛周肉芽组织中IL-17、PI3K、Akt mRNA的表达及象皮生肌膏的干预作用。结果 与假手术组比较,模型组大鼠创面组织中IL-17、p-PI3K、p-Akt蛋白表达明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,象皮生肌膏组、湿润烧伤膏组大鼠创面组织中IL-17、p-PI3K、p-Akt的蛋白表达明显降低,差异有统计学意义(P<0.05),且象皮生肌膏组大鼠创面组织中IL-17、p-PI3K、p-Akt的蛋白表达低于湿润烧伤膏组,差异有统计学意义(P<0.05)。与假手术组比较,模型组大鼠创面组织中IL-17、PI3K、Akt的mRNA表达明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,象皮生肌膏组、湿润烧伤膏组大鼠创面组织中IL-17、PI3K、Akt的mRNA表达明显降低,差异有统计学意义(P<0.05),且象皮生肌膏组大鼠创面组织中IL-17、PI3K、Akt的mRNA表达明显低于湿润烧伤膏组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后7 d、10 d象皮生肌膏组、湿润烧伤膏组大鼠创面愈合率升高,差异有统计学意义(P<0.01)。病理学方面,象皮生肌膏组大鼠创面炎性细胞较少,成纤维细胞成熟且分布整齐,真皮层内胶原纤维丰富且排列整齐,可见新生血管,无明显血管扩张及出血。结论 象皮生肌膏能够抑制肛瘘术后创面炎症反应,加快创面愈合进程,其可能机制与抑制PI3K/Akt通路有关。
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单位湖南中医药大学; 湖南中医药大学第一附属医院