牛传染性鼻气管炎和赤羽病基因芯片检测方法的建立和应用

作者：陈圣军; 孔繁德; 徐淑菲; 张吉红; 唐泰山

来源：中国预防兽医学报, 2013, (12): 980-984.

• 牛传染性鼻气管炎病毒
• 赤羽病病毒
• 寡核苷酸芯片
• 检测 IBRV
• AKAV
• oligonucleotide microarray
• detection

为建立牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)和赤羽病病毒(AKAV)的双重快速检测方法,本研究根据IBRV gB基因和AKAV S基因序列设计合成了2对特异引物和探针,建立了同时检测这两种病毒的基因芯片检测方法,即以合成探针的5'端添加poly T10尾并氨基化固定于经处理的玻璃基片表面作为捕捉序列,采用荧光素Cy3标记正向引物的5'端,对样品的PCR扩增产物进行检测,并通过试验确定其适宜杂交温度为38℃。该方法检测IBRV和AKAV重组质粒的灵敏度分别为3.6×103拷贝/25μL和9.26×104拷贝/25μL,同时通过对牛的腺病毒、牛病毒性腹泻病毒、牛水泡性口炎病毒、口蹄疫病毒及牛白血病病毒等...

• 单位
  宁波出入境检验检疫局; 江苏出入境检验检疫局; 集美大学