丙酮酸乙酯对肝细胞氧化应激损伤的保护作用及其机制研究

作者：王浩; 何义舟; 罗哲

来源：中国临床医学, 2015, 22(02): 195-198.

• 氧化应激损伤
• 坏死
• 凋亡
• 丙酮酸乙酯

目的:探讨丙酮酸乙酯在肝细胞氧化应激损伤中的作用及机制。方法:通过对人肝细胞系L-02进行缺氧/复氧处理各1 h建立氧化应激损伤模型。将L-02根据干预措施分为对照组(Control组)、乳酸钠林格液组(LR组)、丙酮酸乙酯组(EP组)。应用日本日立公司7020全自动分析仪检测细胞培养上清液中天门冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)和丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)浓度;采用Hoechst 33342/碘化丙啶双标记荧光染色以及原位缺口末端标记法(TUNEL)检测各组细胞的凋亡和坏死情况;采用蛋白质印迹(Western blotting)法检测各组caspase-9、caspase-3与多聚二磷酸腺苷核糖聚合酶(PARP)蛋白的表达;采用荧光素发光法测量各组肝细胞内ATP浓度。结果:EP组细胞培养上清液中AST和ALT浓度均低于Control组和LR组(P<0.05);EP组坏死细胞比例低于Control组和LR组(P<0.05),但凋亡细胞比例高于Control组和LR组(P<0.05)。EP组活化形式的caspase-9、caspase-3与PARP蛋白表达水平高于Control组和LR组(P<0.05)。EP组细胞内ATP浓度显著高于Control组和LR组(P<0.05)。结论:EP对肝细胞氧化应激损伤有保护作用,能减少坏死细胞数量,增加凋亡细胞数量,改变坏死及凋亡细胞比例。EP的细胞保护作用机制可能在于改善能量代谢,提高细胞内ATP浓度,激活"凋亡/坏死共同通路",激活凋亡过程。

• 单位
  复旦大学附属中山医院