缺氧对巩膜成纤维细胞内质网应激反应的激活作用及其对巩膜重塑的影响

作者：唐晓兰; 刘玲; 杨倩颖; 李华^*

来源：眼科新进展, 2022, 42(07): 529-533.

DOI：10.13389/j.cnki.rao.2022.0108

• 缺氧
• 巩膜重塑
• 内质网应激
• Ⅰ型胶原蛋白
• 近视

目的 探讨缺氧对巩膜成纤维细胞(HFSF)内质网应激反应的激活作用及其对巩膜重塑的影响。方法 取HFSF随机分为缺氧0 h组、缺氧12 h组、缺氧48 h组。缺氧0 h组细胞正常培养，缺氧12 h组及48 h组细胞分别在含氧体积分数2%的三气培养箱中缺氧处理12 h及48 h。采用Western blot检测肌醇需求酶l (IRE1α)、P-IRE1α、COL1A1、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、BAX及BCL-2蛋白表达情况，免疫荧光染色检测HFSF中α-SMA蛋白含量，流式细胞仪检测细胞凋亡情况，CCK-8检测细胞增殖情况。结果 Western blot检测结果显示：与缺氧0 h组相比，缺氧12 h组IRE1α、α-SMA蛋白表达均升高，COL1A1蛋白表达降低，差异均有统计学意义(均为P<0.05),其余蛋白表达变化不明显，差异均无统计学意义(均为P>0.05);与缺氧0 h组相比，缺氧48 h组IRE1α、P-IRE1α、MMP-2、α-SMA、BAX蛋白表达均升高，COL1A1、BCL-2蛋白表达均降低，差异均有统计学意义(均为P<0.05);与缺氧12 h组相比，缺氧48 h组COL1A1、BCL-2蛋白表达降低，BAX蛋白表达升高，差异均有统计学意义(均为P<0.05),其余蛋白表达变化不明显，差异均无统计学意义(均为P>0.05)。免疫荧光染色结果显示：缺氧12 h组及缺氧48 h组α-SMA蛋白荧光强度均较缺氧0 h组增高，且缺氧48 h组较缺氧12 h组α-SMA蛋白荧光强度升高更明显。流式细胞仪检测结果显示：缺氧0 h组、缺氧12 h组、缺氧48 h组细胞凋亡率分别为(0.617±0.032)%、(2.187±0.212)%、(4.130±0.395)%;缺氧12 h组及缺氧48 h组细胞凋亡率均高于缺氧0 h组，差异均有统计学意义(均为P<0.05),且缺氧48 h组细胞凋亡率高于缺氧12 h组，差异有统计学意义(P<0.05)。CCK-8检测结果显示：缺氧12 h组及缺氧48 h组D450均低于缺氧0 h组，差异均有统计学意义(均为P<0.05);缺氧48 h组与缺氧12 h组相比，差异无统计学意义(P>0.05)。结论 缺氧激活HFSF内质网应激反应，并且可能通过调节胶原代谢、促进细胞转分化及凋亡来参与巩膜重塑。

• 单位
  重庆医科大学附属永川医院