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摘要
【目的】通过桃木葡聚糖内糖基转移/水解酶（xyloglucan endotransglucosylase/hydrolase,XTH）基因家族鉴定与不同肉质桃贮藏过程中相关基因的表达分析，发掘PpXTHs家族成员中参与桃果实软化的重要候选基因，为深入解析PpXTHs在果实采后贮藏过程中的功能研究奠定基础。【方法】根据XTH蛋白保守结构域Glyco＿hydro＿16 domain和XET＿C domain，利用Hmmer 3.1软件对桃蛋白质数据库进行搜索，鉴定桃XTH基因家族成员；利用在线软件ProtParam预测其分子量、理论等电点等理化性质；利用在线分析工具Plant-mPLoc预测其亚细胞定位；MEGA11软件构建系统进化树；运用在线工具MEME对其保守motif进行分析，Tbtools呈现蛋白保守结构域和基因结构图谱；MapChart软件绘制基因在染色体上的分布图；利用实时荧光定量PCR(quantitative reverse transcription PCR,qRT-PCR)技术检测PpXTHs在不同肉质桃贮藏过程中的表达特性。【结果】在桃基因组共鉴定XTH基因家族成员27个，分布在7条染色体上。系统进化树显示，PpXTHs家族成员可分为祖先类群、Ⅰ/Ⅱ亚家族以及ⅢA和ⅢB亚家族。蛋白结构域分析显示所有PpXTHs成员均含有Glyco＿hydro＿16和XET＿C两个蛋白保守结构域。qRT-PCR结果表明，属于ⅢB亚家族的PpXTH33随着溶质桃贮藏期延长，表达量上调，且表达量显著高于同期硬质桃贮藏过程的表达水平；PpXTH33克隆测序结果显示其CDS序列与桃参考基因组一致，长度为924 bp，编码307个氨基酸；激光共聚焦显微镜观察发现PpXTH33与GFP融合蛋白可能主要于细胞壁与细胞核上产生绿色荧光信号。【结论】桃27个PpXTHs家族成员蛋白结构均含有2个XTH蛋白保守结构域，不均匀分布在7条染色体上。PpXTHs在溶质桃和硬质桃贮藏过程中的表达特性显示，PpXTH33与桃采后果实软化密切相关。
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