兔肌3-磷酸甘油脱氢酶的提纯及性质研究

作者：王振伟; 李刚锐; 李琳俐; 王帅坤; 孟延发

来源：中国生物工程杂志, 2013, 33(02): 70-76.

DOI：10.13523/j.cb.20130212

• 兔肌
• 3-磷酸甘油脱氢酶
• 纯化
• 动力学性质 Rabbit muscle Glycerol 3-phosphate dehydrogenase Purification Kinetic properties

目的:研究兔肌3-磷酸甘油脱氢酶的分离纯化方法及其酶学性质,为测定血清甘油三酯所用酶联试剂的开发提供试验基础和理论依据。方法:通过硫酸铵分级沉淀、DEAE-Sepharose、Blue-Sepharose和羟磷灰石纯化兔肌3-磷酸甘油脱氢酶,利用凝胶过滤和梯度PAGE(5%～15%)法测定酶分子量,采用常规酶学动力学分析方法,考察pH、温度、底物浓度以及部分金属离子与有机化合物对酶促反应的影响。结果纯化后的兔肌3-磷酸甘油脱氢酶经PAGE(12%)分析为单一条带;酶分子量为115～122 kDa;酶最适温度45℃,最适pH 9;酸碱稳定范围pH6～9,低于45℃时热稳定性好;最适条件下,以3-...

• 单位
  生物资源与生态环境教育部重点实验室; 四川大学; 生命科学学院