TWIST1在人脐静脉内皮细胞增殖、迁移及血管形成中的作用

作者：谢月樵; 郭丹; 王楠; 尤娜; 黄琬玲; 马小彤^*

来源：生物技术进展, 2022, 12(01): 142-148.

DOI：10.19586/j.2095-2341.2021.0163

• 人脐静脉内皮细胞
• TWIST1基因
• 血管形成
• 增殖
• 迁移

探讨TWIST1在原代人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)增殖、迁移及体外血管生成中的作用。用有靶向人TWIST1基因shRNA(pLL3.7-shTwist1-GFP)的慢病毒液感染试验组细胞,同时以携带Scramble shRNA的慢病毒液(pLL3.7-shCtrl-GFP)感染对照组细胞,用流式细胞术测定细胞感染效率,实时荧光定量PCR(real-time fluorescent quantitative PCR,qRT-PCR)检测shRNA的基因沉默效率。通过制作细胞生长曲线、Annexin V/7AAD染色流式细胞术、细胞划痕实验、小管形成实验、qRT-PCR检测TWIST1表达降低对HUVECs的增殖、凋亡、迁移、血管形成能力以及血管生长因子受体2(vascular endothelial growth factor receptor 2,VEGFR2)基因表达的影响。试验组TWIST1基因表达下降为对照组的30%,表明shTWIST1能有效降低TWIST1基因的表达。与对照组相比,敲降TWIST1能明显抑制HUVECs的增殖(P<0.01),诱导细胞凋亡(P<0.05)。试验组HUVECs划痕愈合率、体外生成的血管样结构数目和总小管分支长度均显著低于对照组(P<0.01);与对照组相比,试验组HUVECs中VEGFR2的表达显著降低(P<0.01)。通过探究HUVECs表达的TWIST1在内皮细胞增殖、存活、迁移和毛细血管样结构的形成中的作用,为TWIST1作为抑制肿瘤血管新生治疗的新靶点提供一定的理论依据。

• 单位
  实验血液学国家重点实验室; 北京协和医学院; 中国医学科学院血液学研究所; 中国医学科学院血液病医院