CRMP4慢病毒载体的构建及其对神经元突起生长的影响

作者：张丹丹; 谭明会; 叶永恒; 陈克恩; 李素梅; 武凤鸣; 郭国庆

来源：中国临床解剖学杂志, 2015, 33(03): 305-310.

DOI：10.13418/j.issn.1001-165x.2015.03.016

• CRMP4
• 慢病毒
• 海马
• 神经元
• 突起

目的探讨CRMP4对海马神经元突起生长的影响。方法利用PCR技术扩增CRMP4目的基因片段,与病毒载体连接,经过PCR、酶切和鉴定后与包装质粒共转293T细胞,制备慢病毒载体,之后感染海马神经元,观察神经元突起生长的变化,并进行定量分析。结果扩增出CRMP4目的基因,成功构建CRMP4慢病毒载体,病毒滴度为1.0×1071.0×108U/ml;对照细胞转染空质粒后见GFP表达,分布于神经元的胞体和突起,细胞随着发育不断极化,分化出树突和轴突,突起不断延长;过表达CRMP4后,可见神经元的突起延长,分支较对照组增多;定量结果显示,神经元突起总长度包括树突和轴突均较对照组增多,分支数目亦较对照组增多,差异显著(P<0.05)。结论成功构建了携带大鼠CRMP4基因的慢病毒表达载体;过表达CRMP4基因可以促进神经元突起的生长。

• 单位
  暨南大学; 暨南大学附属第一医院