草菇菌丝体凝集素凝血活性及其氨基酸残基化学修饰

作者:刘主; 康林芝; 蔡爱群; 叶璐瑶; 霍海霞; 刘静华*
来源:食用菌学报, 2021, 28(05): 96-103.
DOI:10.16488/j.cnki.1005-9873.2021.05.012

摘要

通过磷酸缓冲液浸提、硫酸铵沉淀、DEAE-52纤维素离子交换层析等步骤,从草菇(Volvariella volvacea)菌丝体中分离得到凝集素,进而对蛇、鸭、小鼠、鸡、驴、鸽子、仓鼠7种动物的血红细胞进行凝血实验,并分别用N-溴代丁二酰亚胺(N-bromosuccinimide, NBS)、焦炭酸二乙酯(diethyl pyrocarbonate, DEPC)、苯甲基磺酰氟(phenylmethylsulfonyl fluoride, PMSF)对草菇菌丝体凝集素中的色氨酸残基、组氨酸残基、丝氨酸残基进行化学修饰,检测其凝血活性。结果表明:草菇菌丝体凝集素对蛇、鸭、小鼠、驴、鸽子、仓鼠血红细胞的凝血效价分别为25、24、27、27、24、26,对鸡血红细胞无凝血活性。色氨酸残基被修饰后凝集素凝血活性丧失,组氨酸残基、丝氨酸残基被修饰后对凝集素凝血活性无影响,表明色氨酸残基处于草菇菌丝体凝集素凝血活性中心,是维持草菇菌丝体凝集素凝血活性的必需氨基酸,而组氨酸残基、丝氨酸残基并非维持凝集素凝血活性必需的氨基酸。

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