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摘要
外泌体是细胞之间及细胞和细胞外基质之间信号交流的途径之一。近年来，对外泌体的研究呈现显著增长的态势。在体外细胞培养系统中，为保证细胞正常的生理状态，血清是培养液中必须添加的成分。随之而来的问题是，由于血清中含有大量外泌体，其数量数倍于研究中需要进行针对性研究的特定外泌体，从而对特定外泌体的定量和分析造成了干扰。为了去除培养液血清中的外泌体，很多研究者采用差速离心法、密度梯度离心法等进行处理。该研究通过流式细胞分析对外泌体定量后发现，加入2%血清的培养液在进行差速离心处理后，外泌体数量减少了30.6%；而加入5%的血清培养液，外泌体数量下降了32.4%。由此可见，差速离心处理对不同浓度血清的培养液结果类似，只能去除约30%的血清外泌体，留下约70%的血清外泌体，仍然会对实验数据造成干扰。因此，在人脐静脉内皮细胞体外培养系统中，该研究探索了一种新型血清替代培养法，即以无生物成分的血清替代物XerumFree替代培养液中的大部分血清，经过对一系列配比进行探索发现，当XerumFree与胎牛血清FBS体积比为15:1时，细胞既可以正常生长，又可以分泌外泌体，而背景中外泌体干扰程度降低到2%，从而较好地解决了外源性外泌体形成的背景干扰问题，为体外研究外泌体提供了明确的参考方案。
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单位生物医学工程学院; 上海交通大学
