低氧微环境下siRNA靶向沉默HIF-2α基因对前列腺癌PC-3细胞增殖和凋亡的影响

作者：陈剑晖; 李晓帆; 穆细院; 李永生; 蔡伟忠

来源：福建医科大学学报, 2017, 51(05): 275-281.

• 前列腺肿瘤
• RNA干扰
• 基因
• 细胞增殖
• 细胞凋亡

目的观察体外低氧条件下缺氧诱导因子-2α(HIF-2α)在人前列腺癌细胞PC-3中的表达情况,并研究siRNA沉默HIF-2α基因对前列腺癌PC-3细胞生长及凋亡的影响。方法在体外培养的PC-3细胞中加入化学诱导剂CoCl2建立低氧模型,采用逆转录PCR(RT-PCR)和Western印迹法检测CoCl2诱导HIF-2αmRNA和蛋白表达的时-效和量-效关系。合成HIF-2αsiRNA片段并转染前列腺癌PC-3细胞,采用RT-PCR及Western印迹法检测HIF-2αsiRNA对HIF-2α基因表达的影响,采用MTT法检测转染HIF-2αsiRNA后对PC-3细胞生长的抑制情况,采用流式细胞仪检测RNA干扰对PC-3细胞凋亡的影响。结果 (1)低氧可诱导PC-3细胞的HIF-2αmRNA表达,与常氧组比较,低氧12,24及48h组的HIF-2αmRNA和蛋白表达量逐渐升高(P<0.05)。100μmol/L的CoCl2作用48h可作为最佳前列腺癌细胞PC-3低氧模型。(2)低氧+HIF-2αsiRNA干扰组的HIF-2αmRNA和蛋白表达水平明显低于低氧+阴性对照组和低氧组(P<0.05),而低氧+阴性对照组与低氧组的HIF-2αmRNA和蛋白表达水平无显著性差异(P>0.05)。低氧+HIF-2αsiRNA干扰组细胞增殖受抑制、细胞凋亡增加(P<0.05),而常氧组、低氧组、低氧+阴性对照组细胞增殖活力和凋亡差别均无统计学意义(P>0.05)。结论低氧可促进前列腺癌PC-3细胞表达HIF-2α逐渐上调,siRNA干扰HIF-2α可以抑制低氧状态下前列腺癌PC-3细胞HIF-2α基因的表达,达到抑制细胞增殖、促进细胞凋亡的目的。阻断HIF-2α信号通路可作为激素非依赖前列腺癌治疗的新策略。

• 单位
  福建医科大学附属协和医院