CAAP1抑制肝癌HepG2细胞凋亡而促进其增殖、迁移和侵袭

作者:王一同; 卢鸿健; 孔艺璇; 苏静慧; 刘雨谭; 张荣花; 侯晓丽; 章广玲*
来源:中国肿瘤生物治疗杂志, 2021, 28(03): 254-260.

摘要

目的:探讨CAAP1对肝癌HepG2细胞凋亡、增殖、迁移和侵袭的影响及其作用机制。方法:构建CAAP1过表达载体pcDNA3/CAAP1和敲降载体p Silencer 2.1-U6 neo/shR-CAAP1,转染肝癌HepG2细胞后,qPCR和WB实验分别检测CAAP1mRNA和蛋白的表达水平。实验分为过表达对照组(pcDNA3)、过表达组(pcDNA3/CAAP1)、敲降对照组(pSilencer 2.1-U6 neo,pSilencer)和敲降组(pSilencer 2.1-U6 neo/shR-CAAP1,shR-CAAP1),流式细胞术检测各组细胞凋亡水平,WB检测cleaved caspase 3蛋白表达水平,CCK-8实验检测各组细胞的增殖情况,克隆形成实验检测各组细胞的集落形成能力,划痕和Transwell小室实验检测各组细胞迁移和侵袭能力。检索TCGA数据库,分析CAAP1对肝癌患者OS的影响。结果:成功构建CAAP1的过表达载体pcDNA3/CAAP1和敲降载体shR-CAAP1,转染后pcDNA3/CAAP1组和shR-CAAP1组细胞中CAAP1mRNA及蛋白表达水平均明显增高或降低(均P<0.05)。与pcDNA3组比较,pcDNA3/CAAP1组细胞凋亡率下降32%、cleaved caspase 3蛋白表达水平显著降低(均P<0.05);与p Silencer组比较,shR-CAAP1组细胞凋亡率上升73%,cleaved caspase 3蛋白表达水平显著升高(均P<0.05)。pcDNA3/CAAP1组细胞增殖显著增强(P<0.05),shR-CAAP1组细胞增殖显著降低(P<0.05)。pcDNA3/CAAP1组细胞迁移数增加48%、细胞迁移距离增加59%、细胞侵袭数增加52%(均P<0.05),shR-CAAP1组细胞迁移数减少53%、细胞迁移距离减少29%、细胞侵袭数减少45%(均P<0.05)。TCGA数据库数据分析显示,肝癌组织中CAAP1的高表达与肝癌患者OS呈负相关(P<0.05)。结论:CAAP1能够抑制肝癌HepG2细胞凋亡从而促进其增殖、迁移和侵袭,其可能与肝癌的发生发展密切相关。