茶树硝态氮转运蛋白NRT1.1基因的克隆及表达分析

作者：杨亦扬; 胡雲飞; 万青; 李荣林; 王枫; 阮建云

来源：茶叶科学, 2016, 36(05): 505-512.

DOI：10.13305/j.cnki.jts.2016.05.009

• 茶树
• 硝态氮
• NRT1.1基因
• 实时定量PCR

以茶树(Camellia sinensis(L.))品种龙井43为试材,采用PCR结合RACE技术,克隆得到硝态氮转运蛋白基因(NRT1.1)的c DNA全长序列,基因序列全长1 880 bp,其中开放阅读框(ORF)1 788 bp,编码595个氨基酸,预测蛋白质分子量为65.9 k D,理论等电点为8.99,命名为Cs NRT1.1。序列分析表明,Cs NRT1.1与葡萄NRT1.1氨基酸序列的相似性最高。通过生物信息学分析,对Cs NRT1.1的氨基酸理化性质、亲/疏水性、跨膜区域及亚细胞定位进行了预测。实时定量PCR表达分析表明,茶树根和叶片中Cs NRT1.1在1 mol·L-1 NO3-处理5 min内均受到抑制,叶部Cs NRT1.1表达量0.5 h后即达到最大值,24 h内各个时间点均高于根部,根中表达量Cs NRT1.1始终低于对照。本研究结果为研究茶树对NO3-的吸收、转运和调控机理提供了分子生物学基础。

• 单位
  南京农业大学; 江苏省农业科学院; 作物遗传与种质创新国家重点实验室; 农业部; 中国农业科学院茶叶研究所