摘要
[目的]探究栀子苷(GE)对高糖诱导的肾小管上皮细胞转分化中转化生长因子-β和Smad相关蛋白(TGF-β/Smad)通路的影响。[方法]实验分为对照组、高糖组、GE 1、10、50、100μmol/L组。对照组HK2细胞在5.5 mmol/L低糖DMEM培养液中培养,除对照组外,其余各组均于25 mmol/L高糖DMEM培养液中培养,GE 1、10、50、100μmol/L组同时添加GE,使GE终浓度分别为1、10、50、100μmol/L,干预48 h。显微镜下观察HK2细胞形态;实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测细胞中纤连蛋白(FN)、E-钙黏素(E-cad)、Ⅳ型胶原(COLⅣ)mRNA水平;酶联免疫吸附法(ELISA)检测上清液中白细胞介素(IL)-1β、IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测细胞中转化生长因子-β1(TGF-β1)、Smad3、磷酸化Smad3(p-Smad3)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)蛋白水平。[结果]对照组细胞呈多边形或卵圆形,分布均匀;高糖组细胞部分呈现长梭形、胞核呈梭形变;随着GE剂量的升高,细胞形态逐渐恢复正常。与对照组相比,高糖组细胞中FN、COLⅣmRNA水平,TGF-β1、p-Smad3/Smad3、α-SMA蛋白水平,上清液中IL-1β、IL-6、TNF-α水平升高,细胞中E-cad mRNA水平降低(P<0.05);与高糖组相比,GE 1μmol/L组细胞中FN mRNA水平,TGF-β1、p-Smad3/Smad3、α-SMA蛋白水平,上清液中IL-1β、IL-6、TNF-α水平降低(P<0.05),GE 10、50、100μmol/L组细胞中FN、COLⅣmRNA水平,TGF-β1、p-Smad3/Smad3、α-SMA蛋白水平,上清液中IL-1β、IL-6、TNF-α水平降低,细胞中E-cad mRNA水平升高(P<0.05)。[结论] GE可以抑制高糖诱导的肾小管上皮细胞转分化中TGF-β/Smad通路。
-
单位天津中医药大学第一附属医院