血管内皮生长因子对PC12细胞缺氧损伤凋亡的保护作用

作者：莫世静

来源：全科医学临床与教育, 2018, 16(05): 493-601.

DOI：10.13558/j.cnki.issn1672-3686.2018.05.004

• 血管内皮生长因子
• 缺氧
• PC12细胞
• 凋亡
• 氯化钴

目的观察血管内皮生长因子(VEGF)对氯化钴诱导的PC12细胞缺氧损伤及凋亡的影响并探讨其作用机制。方法应用MTT及Hoechst/PI染色检测VEGF对氯化钴诱导的细胞存活力下降及凋亡的影响。采用RT-PCR和Western-blotting检测XIAP及核转录因子κB(NF-κB)信号蛋白表达情况。采用分光光度法检测Caspase-3活性。结果 MTT结果显示0.6 mmol/L和0.8 mmol/L氯化钴处理PC 12细胞24 h后,VEGF+氯化钴组的细胞活性明显高于氯化钴组,差异有统计学意义(t分别=8.53、5.70,P均<0.05),在0.6 mmol/L氯化钴处理后24 h和48 h,VEGF+氯化钴处理组的细胞活性明显高于氯化钴组,差异有统计学意义(t分别=8.85、7.43,P均<0.05)。RT-PCR和Westernblotting显示氯化钴处理组PC12细胞XIAP m RNA表达水平明显较未给予氯化钴处理的VEGF组下降(t=4.83,P<0.05),而VEGF+氯化钴处理组PC12细胞经氯化钴处理24 h后XIAP m RNA表达水平较氯化钴组明显上升(t=5.71,P<0.05)。VEGF处理可使IκBα蛋白去磷酸化与去泛素化,P65蛋白入核。VEGF+氯化钴处理组的Caspase-3活性比氯化钴处理组明显增加,差异有统计学意义(t=4.81,P<0.05),而VEGF+氯化钴+BAY 11-7085组Caspase-3活性较VEGF+氯化钴处理组明显下降,差异有统计学意义(t=8.17,P<0.05)。Hochest/PI荧光染色显示氯化钴+VEGF组PI阳性细胞较氯化钴组明显减少,而氯化钴+VEGF+BAY11-7085组的PI阳性细胞较氯化钴+VEGF组明显增加。结论VEGF处理能抑制氯化钴诱导的PC12细胞凋亡,其细胞保护作用的机制可能与其激活NF-κB信号有关。

• 单位
  浙江省人民医院; 杭州医学院