低氧预处理通过激活低氧诱导因子1α增强老年人骨髓间充质干细胞促血管新生能力

作者：宋慧芳^*; 谈佳音; 刘阳; 张卫国; 郭蕊^*

来源：解剖学报, 2022, 53(01): 35-41.

DOI：10.16098/j.issn.0529-1356.2022.01.005

• 低氧预处理
• 低氧诱导因子1α
• 老龄
• 骨髓间充质干细胞
• 血管新生
• 免疫印迹法
• 人

目的探讨低氧预处理对老年人骨髓间充质干细胞(hBMSCs)促血管新生能力的影响,为改善老年患者自体干细胞移植治疗缺血性心肌损伤疗效提供支持。方法老年hBMSCs经过低氧预处理后,倒置相差显微镜下摄片观察细胞形态,流式细胞术检测细胞表面标志物,并进行成骨、成脂诱导分化检测其分化潜能。随后收集青年hBMSCs常氧培养基(norCM),老年hBMSCs常氧和低氧培养基(hypoCM),分别为norCM-young、norCM-old和hypoCM-old 3组条件培养基,未加干细胞的等体积培养基为阴性对照(control)组。各组条件培养基分别处理人脐静脉内皮细胞(HUVECs),用CCK-8法检测细胞存活率,用管状结构形成实验检测体外血管新生能力。BCA法检测各组条件培养基总蛋白含量,Western blotting技术检测细胞中及条件培养基中低氧诱导因子1α(HIF-1α)含量。结果低氧预处理对老年hBMSCs形态、表面标志物及分化潜能影响不显著(P>0.05,n≥3)。HypoCM-old组与norCM-old组相比,低氧-复氧培养条件下HUVECs的存活率显著提高(P<0.05,n=5), HUVECs细胞管状结构形成能力也显著提高(P<0.01,n=5)。HypoCM-old组总蛋白量显著高于norCM-old组(P<0.05,n=3),hypoCM-old组hBMSCs中HIF-1α表达量显著高于norCM-old组(P<0.05,n=3),同时hypoCM-old组培养基中HIF-1α的含量显著高于norCM-old组(P<0.01,n=3)。结论低氧预处理的老年hBMSCs通过旁分泌促进体外HUVECs存活和管状结构的形成,而其促进作用与HIF-1α的活化相关。

• 单位
  山西医科大学第一医院; 山西医科大学; 解剖学教研室