摘要
目的:构建能够稳定克隆、表达RIZ1基因中PR结构域的真核表达载体。方法:首先用RT-PCR方法从人食管组织中提取mRNA,逆转录为cDNA,利用cDNA模版扩增出PR结构域,连入T载体。然后提取PR结构域及pcDNA3.1(+)质粒,酶切后连接,转入Trans-T感受态细胞中。结果:提取pcDNA3.1/PR结构域质粒,琼脂糖凝胶电泳,可见大于5 000 bp的目的条带,与预测结果一致,测序结果正确。结论:构建PR结构域真核表达载体成功,为进一步实验研究PR结构域在食管癌细胞中的表达与功能奠定了基础。
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单位天津医科大学总医院