人脐带间充质干细胞对难治性免疫性血小板减少症患者B淋巴细胞分化及分泌功能的影响

作者：曾玉晓; 徐玲珑; 吴迪炯; 叶宝东; 高雁婷; 刘文宾; 周郁鸿

来源：中华临床免疫和变态反应杂志, 2016, 10(03): 207-212.

• 血小板减少
• 间质干细胞
• B淋巴细胞

目的探讨人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,h UC-MSCs)对难治性免疫性血小板减少症(refractory immune thrombocytopenia,r ITP)患者B淋巴细胞分化及分泌功能的影响。方法酶消化法提取健康胎儿h UC-MSCs;密度梯度离心法分离2012年6月至2013年10月浙江省中医院26例r ITP患者和6名健康供者的外周血单个核细胞;美洲商陆(Pokeweed,PWM)刺激外周血B细胞分化;酶联免疫吸附测定法(enzyme-linked immuno sorbent assay,ELISA)检测r ITP患者和健康供者外周血单个核细胞和h UC-MSCs共培养时IgG、IgM的分泌量;En Vision免疫组化法测B细胞诱导的成熟蛋白-1(B lymphocyte-induced maturation protein1,Blimp-1)表达。结果 (1)流式细胞技术测健康胎儿脐带提取的h UC-MSCs表面CD44表达为99.8%。(2)PWM浓度为30 mg/L,作用4 d时r ITP患者组IgG、IgM分泌量分别为(7.39±1.42)和(5.44±0.17)μg/L,明显高于健康供者组(P=0.014、0.039)。(3)h UC-MSCs和r ITP患者外周血单个核细胞以2∶10共培养时IgG、IgM分泌量分别为(4.98±1.63)μg/L和(3.78±0.82)μg/L,明显低于无h UC-MSCs时IgG、IgM分泌量(P=0.005、0.003),且和健康供者组差异无统计学意义(P=0.266、0.543);此比例下rITP患者组Blimp-1蛋白表达率为33.51%,较无h UC-MSCs时明显下降(P=0.026),与健康供者组比差异无统计学意义(P=0.076)。结论 hUC-MSCs和r ITP患者外周血单个核细胞以2∶10比例共培养,可明显减少rITP患者IgM、IgG的分泌量,抑制Blimp-1蛋白的表达,提示hUC-MSCs对r ITP患者B细胞分化为浆细胞分泌抗体有一定的抑制作用,为临床hUC-MSCs治疗rITP提供一定的实验依据。

• 单位
  浙江省丽水市人民医院; 第一临床医学院; 浙江中医药大学