革胡子鲶生长激素成熟肽cDNA克隆及其在大肠杆菌中的表达

作者：杨学明; 何荆洲; 张立; 黄雄军; 郭亚芬; 蒋和生

来源：安徽农业科学, 2008, 36(35): 15381-15383.

DOI：10.13989/j.cnki.0517-6611.2008.35.149

• 革胡子鲶
• 生长激素
• 成熟肽
• cDNA克隆
• 原核表达

[目的]构建革胡子鲶生长激素基因原核表达体系。[方法]采用PCR方法,扩增得到了革胡子鲶生长激素基因成熟肽的cDNA序列,将该序列克隆至原核表达载体pRSET-A,构建重组质粒pRSET-mGH,并在大肠杆菌BL21(DE3)pLysS中进行表达。[结果]革胡子鲶生长激素成熟肽cDNA序列全长534 bp,编码1个由178个氨基酸残基组成的生长激素成熟肽,分子量为20.28 kDa,等电点为5.93。SDS-PAGE和Western blot分析表明,表达的目的融合蛋白分子量为27.41 kDa,主要以非可溶性的包涵体形式存在于菌体沉淀中。目的融合蛋白的表达量高达细菌沉淀蛋白总量的36.8%。[结论]该研究为革胡子鲶生长激素的产业化开发和应用奠定了基础。

• 单位
  广西大学; 广西水产研究所; 动物科技学院