IL-6对小鼠胚胎心肌细胞增殖能力的影响及发育依赖性变化

作者：顾浩南; 王淇; 孙惠美; 周易; 梁华敏^*

来源：华中科技大学学报(医学版), 2023, 52(06): 743-748.

• 白细胞介素6
• 胚胎心肌细胞
• 心肌再生
• 心脏微环境

目的 白细胞介素6(interleukin 6,IL-6)是心肌细胞损伤后心脏微环境中重要的细胞因子，可以提高心肌细胞自身的增殖能力从而促进心脏修复。本研究旨在探索IL-6对小鼠胚胎心肌细胞增殖能力的影响及其发育依赖性变化。方法 用酶解法获得胚胎发育早期(early embryonic developmental stage, EDS)和发育晚期(late embryonic developmental stage, LDS)的单个心肌细胞，心肌细胞分别在20%DMEM培养液中培养24 h,然后再分别加入10 ng/mL和50 ng/mL IL-6处理24 h;用免疫荧光技术定位α-actinin+心肌细胞并统计BrdU+α-actinin+细胞核数目/α-actinin+细胞核百分比和BrdU+α-actinin+单核心肌细胞数目/α-actinin+单核心肌细胞数目百分比，研究IL-6对心肌细胞增殖能力的影响；利用Western blot技术检测关键信号通路中关键蛋白的磷酸化水平。结果 10 ng/mL IL-6不改变EDS心肌增殖能力，但对LDS心肌细胞增殖能力有显著促进作用；50 ng/mL IL-6显著抑制EDS BrdU+α-actinin+单核心肌细胞比例，增加LDS BrdU+α-actinin+细胞核和BrdU+α-actinin+单核心肌细胞比例。10 ng/mL IL-6和50 ng/mL IL-6抑制EDS心肌细胞Akt的磷酸化、对STAT3和ERK的磷酸化水平无显著影响；但在LDS,10 ng/mL IL-6和50 ng/mL IL-6抑制心肌细胞的Akt的磷酸化，增加STAT3的磷酸化，对ERK的磷酸化水平无显著影响。检测这3个蛋白质的基础磷酸化状态发现：STAT3、Akt和ERK的总蛋白量和磷酸化水平均呈发育依赖性下降。结论 IL-6影响胚胎心肌细胞的自我更新能力，且具有发育依赖性和浓度依赖性。这可能与胚胎发育不同时期的关键蛋白及其磷酸化水平存在差异，因而IL-6在不同发育阶段靶向不同的信号通路有关。这些发现为细胞替代疗法的研究在心肌微环境层面提供了重要线索。

• 单位
  基础医学院; 华中科技大学