蔗糖密度梯度离心法纯化流感病毒工艺的优化

作者：顾建阳; 刘旭光; 郭占龙; 孙志伟; 杜金东; 徐文; 孙宇; 曹海丹; 刘燕; 曾亮; 王思燕; 王亚军

来源：中国生物制品学杂志, 2015, 28(08): 848-855.

DOI：10.13200/j.cnki.cjb.001012

• 流感病毒
• 蔗糖密度梯度离心
• 纯化

目的优化蔗糖密度梯度离心法纯化流感病毒的工艺参数。方法在不同进样量(600、700和800 ml)时,检测经蔗糖密度梯度离心纯化后各紫外检测峰的糖浓度、血凝滴度及卵清蛋白含量,并对血凝滴度大于1∶480的检测峰样品进行蛋白质含量和血凝素含量检测,确定最佳收峰位置、糖度范围及病毒浓缩液进样量;在不同比例的30%和50%的蔗糖溶液、不同离心时间(2、3和4 h)条件下对流感病毒浓缩液进行蔗糖密度梯度离心纯化,检测纯化后的病毒纯化液蛋白质、血凝素及卵清蛋白含量,计算蛋白质含量与血凝素含量比值及血凝素回收率,确定最佳离心时间。结果确定最佳收峰位置为第三峰,糖度范围为30%50%之间;当病毒浓缩液进样量为600700 ml时,30%蔗糖溶液进液量为450550 ml,55%蔗糖溶液进液量为400500 ml,转速为90 639×g离心3 h后,可获得最佳纯化效果。结论确定了蔗糖密度梯度离心法纯化流感病毒的最佳工艺参数,为进一步提高流感病毒的纯化效果提供了参考。

• 单位
  长春生物制品研究所