干扰STX18-AS1通过靶向miR-204保护心肌细胞

作者：郭春棉; 廉坤^*; 刘彬

来源：心脏杂志, 2023, 35(02): 130-140.

• LncRNA STX18-AS1
• miR-204
• 心肌细胞
• 增殖
• 凋亡
• 氧化应激

目的 探讨干扰长链非编码RNA STX18-AS1(long non-coding RNA, LncRNA STX18-AS1)是否通过上调微小RNA-204(miR-204)的表达从而影响心肌细胞缺氧损伤。方法 体外培养心肌细胞H9C2，采用二氯化钴(CoCl2)处理心肌细胞建立细胞缺氧损伤模型，采用qRT-PCR检测CoCl2处理不同时间点STX18-AS1、miR-204的表达量；实验设置对照组、模型组、si-NC组、si-STX18-AS1组、miR-NC组、miR-204组。采用甲基噻唑基四唑(MTT)检测细胞增殖活性；流式细胞术与TUNEL检测细胞凋亡率；采用生化试剂盒检测乳酸脱氢酶(LDH)活性、丙二醛(MDA)水平、超氧化物歧化酶(SOD)活性、过氧化氢酶(CAT)活性；双荧光素酶报告实验验证STX18-AS1、miR-204的靶向关系。结果 与对照组比较，在CoCl2处理6 h、12 h、18 h、24 h时模型组和si-NC组STX18-AS1表达水平升高(P<0.01),miR-204表达水平降低(P<0.01)；与模型组、si-NC组比较，在CoCl2处理6 h、12 h、18 h、24 h时si-STX18-AS1组STX18-AS1的表达水平降低(P<0.01),miR-204的表达水平升高(P<0.01)；与对照组比，模型组、si-NC组细胞增殖活性降低(P<0.01)，细胞凋亡率及LDH活力、MDA的水平升高(P<0.01),SOD、CAT的活力降低(P<0.01)；与模型组、si-NC组比较，si-STX18-AS1组细胞增殖活性升高(P<0.01)，细胞凋亡率及LDH活力、MDA的水平降低(P<0.01),SOD、CAT的活力升高(P<0.01)；转染miR-204mimics对心肌细胞增殖活性、凋亡及氧化应激的作用与转染si-STX18-AS1的作用相同；双荧光素酶报告实验证实STX18-AS1可靶向结合miR-204。结论 干扰STX18-AS1表达可能通过上调miR-204，抑制细胞凋亡、促进增殖，减轻CoCl2诱导的心肌细胞氧化损伤。

• 单位
  第一附属医院心血管内科; 中国人民解放军空军军医大学