艳山姜挥发油对四氧嘧啶诱导的胰岛细胞损伤保护作用及机制

作者：文波; 罗芳; 付凌云; 徐旖旎; 陶玲; 张甜; 林浩恒; 沈祥春^*

来源：贵州医科大学学报, 2023, 48(07): 767-773.

DOI：10.19367/j.cnki.2096-8388.2023.07.004

• 艳山姜挥发油
• 四氧嘧啶
• 糖尿病
• NIT-1
• 胰岛细胞
• 细胞凋亡

目的 探讨艳山姜挥发油(EOFAZ)对四氧嘧啶诱导大鼠胰岛细胞(NIT-1)损伤的保护作用及机制。方法 体外培养NIT-1细胞至对数生长期，测定不同浓度四氧嘧啶(0、1、4、10、20、40、60、80及100 mmol/L)下细胞存活率，取存活率较高的浓度进行后续实验；细胞分为对照组、模型组、EOFAZ低、中、高剂量组(分别为50、100及200μg/L),采用MTT法检测各组细胞存活率，生化法检测丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)含量，ELISA法检测乳酸脱氢酶(LDH)含量和胰岛素分泌量，Western blot法检测B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2关联X蛋白(Bax)以及半胱氨酸-天冬氨酸特异性蛋白酶9(Caspase-9)蛋白的表达；机制研究进一步设置EOFAZ组(200μg/L)、Z-VAD-FMK组(10μmol/L)以及EOFAZ+Z-VAD-FMK组(200μg/L EOFAZ+10μmol/L Z-VAD-FMK),采用Western blot法检测Caspase-9蛋白的表达。结果 选择40 mmol/L四氧嘧啶(存活率70.7%)作为诱导细胞最佳损伤浓度，并复制NIT-1细胞损伤模型；与对照组比较，模型组细胞存活率降低、MDA和LDH释放量增加、SOD、GSH-PX释放和胰岛素分泌量减少、Bcl-2蛋白表达下调、Bax和Caspase-9蛋白表达上调(P<0.05);与模型组比较，EOFAZ各剂量组细胞存活率升高、胰岛素分泌增加(P<0.05),EOFAZ中、高剂量组MDA和LDH释放降低、SOD和GSH-PX释放量增加、Bcl-2蛋白表达上调、Bax和Caspase-9蛋白表达下调、Bax/Bcl-2降低(P<0.05);与EOFAZ组、Z-VAD-FMK组比较，EOFAZ+Z-VAD-FMK组Caspase 9蛋白表达均下调(P<0.05)。结论 EOFAZ可改善四氧嘧啶诱导的NIT-1胰岛细胞损伤，其机制与抑制细胞凋亡有关。

• 单位
  贵州医科大学; 神经内科