金黄葡萄球菌肠毒素C3基因的克隆及原核表达

作者：王敏; 曹虹; 李先平; 郑荣; 吴翔

来源：中国生物制品学杂志, 2010, (03): 256-260.

DOI：10.13200/j.cjb.2010.03.38.wangm.015

• 金黄葡萄球菌
• 肠毒素C3
• 克隆
• 原核表达 Stapylococcus aureus
• Enterotoxin C3(SEC3)
• Cloning
• Prokaryotic expression

目的克隆并原核表达金黄葡萄球菌肠毒素C3(SEC3)基因。方法以金黄葡萄球菌基因组DNA为模板,扩增SEC3基因中编码成熟蛋白的基因片段,克隆至pET-32a( )表达载体,构建重组表达质粒SEC3-pET-32a,转化E.coli BL21(DE3),IPTG诱导表达。表达产物经Ni-NTA亲和层析纯化后,进行SDS-PAGE和Western blot分析。结果经PCR扩增获得720bp的SEC3基因;重组表达质粒构建正确;表达产物的相对分子质量约为43000,为可溶性表达;纯化的重组蛋白具有良好的反应原性。结论已成功克隆并原核表达了SEC3基因,为单克隆抗体和诊断试剂的制备及SEC3抗毒素...

• 单位
  中南大学湘雅二医院; 中南大学湘雅医学院