赖氨酸对原代奶牛乳腺上皮细胞中酪蛋白及mTOR信号通路相关基因表达的影响

作者：高海娜; 韩荣伟; 郑楠; 胡菡; 李发弟; 王加启

来源：甘肃农业大学学报, 2015, 50(03): 7-15.

DOI：10.13432/j.cnki.jgsau.2015.03.028

• 赖氨酸
• 酪蛋白
• mTOR
• 细胞增殖
• 基因表达

为了在探究单一添加不同浓度的赖氨酸对原代奶牛乳腺上皮细胞的增殖,以及mTOR信号通路介导的酪蛋白合成相关基因的影响.试验用厄尔平衡溶液(EBSS)代替正常培养基来处理原代奶牛乳腺上皮细胞,在此基础上依次添加不同浓度的赖氨酸,采用MTT法检测细胞12h和24h的增殖和利用qRT-PCR技术检测4个编码酪蛋白基因和8个mTOR信号通路中与乳蛋白合成翻译相关基因的相对表达量.结果表明:添加赖氨酸12h,浓度为0.524mmol/L时,原代奶牛乳腺上皮细胞增殖数量增加(P=0.05);添加赖氨酸24h,浓度为0.58mmol/L时,细胞增殖数量增加(P<0.01).当赖氨酸的添加浓度为0.516 mmol/L时,CSN1S1、CSN1S2、CSN2和CSN3基因表达均显著上调(P<0.01).当赖氨酸添加量为0.516mmol/L时,mTOR和raptor基因的表达量显著上调(P<0.05).在添加不同浓度的赖氨酸时,下游通路信号因子S6K1、4EBP1和eEF2基因表达均显著上调(P<0.01);rps6基因表达上调,eIF4E基因表达下调,但差异均不显著.以上结果表明,补充赖氨酸能显著促进乳腺上皮细胞中酪蛋白的合成,这一过程与mTOR信号通路介导蛋白质合成相关.

• 单位
  中国农业科学院北京畜牧兽医研究所; 甘肃农业大学; 青岛农业大学; 农业部; 动物营养学国家重点实验室