肝脏H19在p,p′-DDE干扰糖代谢关键基因中的作用

作者：郭晓晨; 高明; 彭雪云; 吴南翔^*

来源：预防医学, 2022, 34(07): 659-664.

DOI：10.19485/j.cnki.issn2096-5087.2022.07.003

• H19
• p,p′-DDE
• 甲基化
• 糖代谢

目的 研究肝脏长链非编码RNA H19在2, 2-双（4-氯苯基）-1, 1-二氯乙烯（p,p′-DDE）干扰糖代谢关键基因中的作用。方法 取人胚胎肝细胞（CCC-HEL-1）分为溶剂对照（DMSO）组、0.1μmol/L p,p′-DDE组、1μmol/L p,p′-DDE组、10μmol/L p,p′-DDE组、siRNA+DMSO组、siRNA+10μmol/L p,p′-DDE组；分别采用亚硫酸氢盐法、实时荧光定量PCR法和BCA法检测各组肝细胞核因子4α (HNF4α)、叉头框转录因子O1 (FoxO1)和胰岛素样生长因子2(IGF2)的启动子区域甲基化、mRNA表达和蛋白表达水平；比较各组H19 mRNA表达水平和相关基因启动子区域甲基化水平及后续转录表达的变化。结果 不同剂量p,p′-DDE单独暴露后，H19表达增加，10μmol/L p,p′-DDE组H19mRNA表达水平高于DMSO组（1.31±0.25和1.02±0.22;P<0.05）。与DMSO组比较，10μmol/L p,p′-DDE组HNF4α基因启动子甲基化水平降低[（38.59±32.77）%和（61.43±24.64）%]、mRNA表达水平升高（1.33±0.26和1.03±0.28），差异均有统计学意义（P<0.05）;FoxO1和IGF2基因启动子甲基化、m RNA和蛋白表达水平无明显变化（P>0.05）。经siRNA转染H19沉默后，与10μmol/L p,p′-DDE组比较，siRNA+DMSO组HNF4α基因启动子甲基化水平升高[（71.33±22.23）%和（38.59±32.78）%]、m RNA表达水平降低（0.71±0.17和1.33±0.26）,FoxO1基因启动子甲基化水平升高[（47.73±34.24）%和（25.09±25.35）%],IGF2 mRNA表达水平升高（1.39±0.25和0.80±0.20），并且IGF2蛋白表达水平高于DMSO组（1.03±0.11和0.74±0.12），差异均有统计学意义（P<0.05）。结论 肝细胞H19可通过调节基因启动子甲基化修饰程度，改变HNF4α、FoxO1和IGF2的转录与表达，在p,p′-DDE暴露诱发的糖稳态失调中发挥作用。

• 单位
  公共卫生学院; 杭州医学院