摘要
目的 研究miR-328-3p对白细胞介素17(IL-17)诱导的结直肠癌Caco-2细胞转移的影响和机制。方法 实时定量PCR检测Caco-2结直肠上皮细胞和结直肠癌细胞中miR-328-3p、叉头盒P3(FOXP3)和IL-17 mRNA表达。将miR-328-3p模拟物(mimics)转染至结直肠癌Caco-2细胞中,然后给予IL-17诱导处理后,TranswellTM小室测定细胞侵袭和迁移,明胶酶谱法测定细胞中基质金属蛋白酶2(MMP2)和MMP9活性。双荧光素酶报告基因实验验证miR-328-3p与FOXP3的靶向调控关系,蛋白质印迹法检测miR-328-3p mimics对Caco-2细胞中FOXP3蛋白表达的影响。将FOXP3过表达载体(pcDNA3.1-FOXP3)和miR-328-3p mimics共转染到Caco-2细胞,利用上述相同方法测定细胞侵袭、迁移和细胞MMP2、 MMP9活性。结果 与结直肠上皮细胞比较,miR-328-3p在结直肠癌细胞中的表达水平降低,FOXP3和IL-17 mRNA水平升高。转染miR-328-3p mimics可降低IL-17诱导处理后的Caco-2细胞侵袭和迁移能力及细胞MMP2、 MMP9活性。miR-328-3p靶向结合并抑制Caco-2细胞FOXP3蛋白表达。转染pcDNA3.1-FOXP3可降低miR-328-3p mimics对IL-17诱导的Caco-2细胞侵袭、迁移及细胞MMP2、 MMP9活性的影响。结论 miR-328-3p可能通过靶向抑制FOXP3减弱IL-17诱导的结直肠癌Caco-2细胞的侵袭和迁移能力。
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单位信阳职业技术学院