三叶青细胞悬浮培养体系的条件优化和总黄酮含量的测定研究

作者：何海燕; 付跃; 覃拥灵^*; **^*

来源：饲料研究, 2023, 46(07): 77-80.

DOI：10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.07.016

• 三叶青
• 细胞培养
• 总黄酮

试验旨在探讨使用三叶青细胞悬浮培养生产三叶青黄酮的可行性。试验以野生三叶青叶片和茎段为外植体诱导愈伤组织，测定增殖、单细胞培养及其总黄酮含量，悬浮培养细胞经不同液体培养基配方、光照方式、摇床转速、接种量、p H值、培养天数培养，以乙醇为溶剂，回流提取总黄酮，使用NaNO2-Al(NO3)3显色，在500 nm处用紫外分光光度计测定总黄酮含量。结果显示，三叶青最佳培养基为MS+1.5 mg/L 6-BA+2.5 mg/L 2-4D+3 mg/L NAA+0.4 mg/L 6-KT,8 h/d光照，摇床转速110 r/min，接种量25 m L/L,pH值5.8，培养时间为13 d。研究表明，三叶青细胞培养可生产黄酮，最优培养条件下三叶青细胞悬浮培养体系黄酮积累量可达20.524 mg/g。

• 单位
  广西卫生职业技术学院; 生物工程学院; 河池学院