十字花科黑腐病菌全局转录后调控蛋白RsmA抑制胞外蛋白酶产生

作者：许缵宗; 梁玉霖; 吴轲; 林婷; 陈秋莲; 唐东阶^*

来源：基因组学与应用生物学, 2023, 1-15.

• 十字花科黑腐病菌(Xcc)
• RsmA
• 胞外蛋白酶
• prtA

胞外蛋白酶、胞外淀粉酶和胞外纤维素酶是十字花科黑腐病菌(Xanthomonas campestris pv. campestris， Xcc)的重要致病因子，它们的表达受到严格的调控。本实验室之前的研究发现，在Xcc8004菌株中，编码全局转录后调控蛋白RsmA的基因rsmA缺失导致胞外淀粉酶和胞外纤维素酶产量显著下降，但不影响胞外酶蛋白酶的产量。因此认为，RsmA正向调控胞外淀粉酶和胞外纤维素酶的产生，而不调控胞外酶蛋白酶的产生。为了进一步明确RsmA是否参与胞外蛋白酶的表达调控，本研究构建了rsmA的过表达株OErsmA，检测了其胞外蛋白酶产量，并和带有空的过表达载体的野生型菌株(WT/pB)的胞外蛋白酶产量进行了比较。结果发现，OErsmA的胞外蛋白酶产量比WT/pB显著下降，证明RsmA具有抑制胞外蛋白酶产生的功能。Northern杂交结果显示，主胞外蛋白酶基因prtA的mRNA积累量在OErsmA和在WT/pB中没有明显差异。而凝胶阻滞实验(electrophoretic mobility shift assay，EMSA)结果显示，(His)6-RsmA能够与prtA mRNA的SD序列(shine-dalgarno sequence)区域特异结合，预示RsmA通过抑制prtA mRNA的翻译起始，而不是转录，来负调控prtA的表达，从而抑制胞外蛋白酶的产生。

• 单位
  亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室; 广西大学