摘要
目的探讨枳实含药血清对大鼠胃Cajal间质细胞(ICCs)内质网应激(ERS)损伤的影响及机制。方法采用酶解法分离培养ICCs并行c-kit免疫荧光染色法鉴定细胞。使用衣霉素(Tm)构建ICCs内质网应激模型,4苯基丁酸(4-PBA)抑制内质网应激。血清药理学方法制备枳实含药血清。取对数生长期的ICCs,随机分为四组,ICCs组正常培养,ERS模型组予1μg/m L Tm处理,抑制剂组予含1μg/m L Tm和10 mmol/L 4-PBA处理,枳实组予1μg/m L Tm和20%枳实含药血清,每组作用时间均为24 h。透射电子显微镜观察胃ICCs内质网的超微结构;实时荧光定量PCR法检测ERS相关因子葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、激活转录因子6(ATF6) mRNA表达。结果成功分离、培养并鉴定ICCs。透射电子显微镜下正常ICCs的内质网结构正常,排列整齐;模型组ICCs细胞器减少,内质网肿胀,扩张、囊泡化改变、排列紊乱;枳实组ICCs内质网肿胀,呈局限性扩张。与ICCs组比较,ERS模型组GRP78、ATF6 mRNA表达升高(P均<0. 05);与ERS模型组比较,枳实组GRP78、ATF6 mRNA表达降低(P均<0. 05)。结论枳实含药血清可减轻ICCs细胞的ERS损伤,其机制可能与调控ERS ATF6通路有关。
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单位广西医科大学第一附属医院; 上海中医药大学附属曙光医院