猪繁殖与呼吸综合征病毒转录调控序列顺式作用元件的鉴定及其在基因转录表达中的机制解析

作者：张宽; 陈金霞; 张玉娇; 杜楠楠; 郑浩; 姜一峰; 李丽薇; 虞凌雪; 周艳君; 童武; 童光志; 高飞^*

来源：中国动物传染病学报, 2023, 31(02): 13-21.

DOI：10.19958/j.cnki.cn31-2031/s.2023.02.008

• 猪繁殖与呼吸综合征病毒
• 转录调控序列
• 非连续性转录

猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒（PRRSV）的转录调控序列（TRS）在sg mRNA的合成中起着至关重要的作用。为了深入了解TRS在病毒亚基因组转录和翻译过程中的作用，本研究通过对高致病性PRRSV细胞传代致弱株HuN4-F112的转录调控序列进行鉴定，并构建了一系列针对TRS6突变以及将TRS6替换为其他Body TRS的全长感染性克隆。结果表明，同时突变TRS6核心寡核苷酸3’端两个碱基或同时缺失5’端和3’端侧翼序列的全长突变体克隆均不能拯救出病毒，而单独缺失TRS6 5’端或3’端侧翼序列的全长突变体克隆可以拯救出病毒，但侧翼序列缺失后拯救出的病毒相较于原始亲本病毒的滴度有所下降；将HuN4-F112-EGFP的TRS6替换为TRS2、3、7均可以拯救出病毒，并有相似的生长特性，但含有TRS2的重组病毒滴度相对较低，而将TRS6替换为TRS4或TRS5后，无法拯救出病毒。本研究鉴定了HuN4-F112的一系列Body TRS在基因组中的相对位置，同时也证明了ORF1b和ORF2a基因区中4种不同的Body TRS都可以引导基因稳定高效的表达，该研究为今后以PRRSV疫苗株为活病毒载体进行多价重组疫苗的研发奠定了基础。

• 单位
  扬州大学; 中国农业科学院上海兽医研究所; 江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心