摘要
目的观察miR-124对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞迁移和侵袭的调控作用,并探讨其作用机制。方法取NSCLC细胞系A549,分为对照组(转染microRNA scramble)、miR-124组(转染miR-124 mimics)和miR-124+Smad4组(转染miR-124 mimics和pc DNA3.1-Smad4),采用细胞划痕实验和Transwell小室基质渗透实验观察三组细胞迁移和侵袭能力,蛋白印迹法测定E-Cadherin、N-Cadherin、Vimentin蛋白表达。将A549分为三组,野生型质粒组、突变型质粒组及阴性对照组,采用荧光素酶法鉴定miR-124与Smad4的靶向关系。结果 miR-124组的划痕愈合率低于miR-124+Smad4组和对照组,侵袭细胞数少于其他两组(P均<0.01)。miR-124组E-cadherin、Vimentin蛋白相对表达量高于miR-124+Smad4组和对照组,N-cadherin蛋白相对表达量低于其他两组(P均<0.05)。野生型质粒组萤光素酶活性显著低于阴性对照组和突变型质粒组,证实miR-124与Smad4之间存在靶向关系。结论miR-124通过抑制Smad4基因表达抑制上皮间质转化,进而抑制NSCLC细胞迁移和侵袭。
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单位武汉市中心医院; 华中科技大学同济医学院; 中国人民解放军广州军区武汉总医院