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摘要
【目的】确定江西省某猪场哺乳仔猪发生腹泻的病因。【方法】对送检的仔猪小肠样品进行猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus, PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(Transmissible gastroenteritis virus, TGEV)和猪轮状病毒(Porcine rotavirus, PoRV)的RT-PCR检测，将阳性样品接种MA104细胞传代进行PoRV的分离；对分离毒株进行电镜观察、间接免疫荧光试验、PoRV VP4和VP7基因序列测序和动物回归等试验。【结果】猪小肠病料样品经终浓度15μg/mL的胰酶处理37℃孵育2 h,接种MA104细胞，能在细胞上增殖传代，第6代开始表现稳定的细胞病变；电镜观察可见病毒粒子直径大小为61～70 nm,平均大小为65 nm,呈带有短纤突且外缘光滑的形似车轮状的粒子，具有轮状病毒粒子典型的形态特征；间接免疫荧光试验和RT-PCR检测均为PoRV阳性，确定该分离株为PoRV。分离株VP4和VP7基因序列分析显示，VP4基因型与P[23]基因型相似性最高，VP7基因型与G5基因型相似性最高，根据A群轮状病毒最新分类方法，分离株属于G5P[23]型。动物回归试验结果显示，经口感染该分离株的1日龄初生仔猪于感染后24 h左右陆续出现水样腹泻、呕吐等临床症状，并能在粪便中检测到PoRV。【结论】通过MA104细胞连续传代，从江西某猪场的腹泻仔猪小肠样品成功分离到1株PoRV,该分离株属于G5P[23]型PoRV,为哺乳仔猪发生腹泻的病原。
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单位江西农业大学; 江西金伊博生物科技有限公司
