微小核糖核酸-29b通过靶向髓样细胞白血病-1影响脑缺血/再灌注损伤时神经细胞凋亡

作者：陈浩; 黄智; 张帅; 王黎洲; 周石

来源：介入放射学杂志, 2021, 30(07): 697-702.

DOI：10.3969/j.issn.1008-794X.2021.07.012

• miR-29b
• 脑缺血/再灌注损伤
• MCL-1
• N2a细胞
• 细胞凋亡

目的确定微小核糖核酸(microRNA,miRNA,miR)在脑缺血/再灌注(I/R)损伤中对神经细胞凋亡的影响,并探讨其潜在机制。方法培养小鼠成神经细胞瘤(N2a)细胞,构建氧糖剥夺(OGD)/复氧(R)模型,模拟体外脑I/R状态。N2a细胞随机分为空白对照组(control)、OGD/R组(OGD/R)、OGD/R+转染miR-29b模拟物组(mimics)、OGD/R+转染miR-29b抑制剂组(inhibitor)、OGD/R+转染miR-29b模拟物阴性对照组(mimics NC)、OGD/R+转染miR-29b抑制剂阴性对照组(inhibitor NC)。实时定量聚合酶链反应(PCR)检测各组miR-29表达变化。细胞计数试剂盒(CCK)-8和流式细胞术分别检测miR-29b和miR-29b抑制剂对N2a细胞活力和凋亡的影响。免疫印迹法检测抗凋亡蛋白髓样细胞白血病(MCL)-1、B淋巴细胞瘤(BCL)-2及半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶(caspase)-3表达。双荧光素酶分析验证miR-29b与MCL-1间相互作用。结果与control组相比,OGD/R组miR-29b表达明显升高。与OGD/R组相比,mimics组N2a细胞凋亡增加,存活率降低,MCL-1、BCL-2表达下调,caspase-3表达上调,而这种效应在inhibitor组受到逆转。双荧光素酶分析显示miR-29b可通过与MCL-1的3'非翻译区(UTR)端结合下调MCL-1表达。结论 miR-29b在脑I/R损伤过程中通过靶向MCL-1促进神经细胞凋亡。这为缺血性脑卒中治疗提供了一潜在的新靶点。

• 单位
  贵州医科大学