牛副流感病毒3型3种基因型多重RT-PCR检测方法的建立

作者：杨帆; 石顺利; 徐娜; 雷宇; 常塔娜; 李平安; 关平原

来源：中国畜牧兽医, 2018, 45(01): 32-38.

DOI：10.16431/j.cnki.1671-7236.2018.01.004

• 牛副流感病毒3型(BPIV3)
• 基因型
• 多重RT-PCR
• 检测

为建立检测牛副流感病毒3型(bovine parainfluenza virus type 3,BPIV3)3种基因型的多重RT-PCR方法,根据GenBank上发表的BPIV3 3种基因型病毒株的HN基因序列设计特异性引物,优化反应体系建立多重RT-PCR方法。结果显示,方法可同时扩增出BPIV3A型150bp、B型253bp和C型342bp的特异性片段,与牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)、牛呼吸道合胞体病毒(BRSV)、牛病毒性腹泻病毒(BVDV)、小反刍兽疫病毒(PPRV)、牛支原体、牛布鲁氏菌、羊布鲁氏菌、牛源多杀性巴氏杆菌A型和B型均无交叉反应,A、B、C基因型BPIV3最低阳性质粒检测量分别为0.89×104、0.92×104和1.53×104拷贝/μL。本试验建立的多重RT-PCR检测方法操作方便、特异性强,应用于临床样本的检测,可快速检测BPIV3 3种基因型。

• 单位
  内蒙古农业大学; 农业部