非洲猪瘟病毒p22蛋白单克隆抗体的制备及鉴定

作者：矫健; 李建达; 韩先杰; 张琳; 张玉玉; 任素芳; 刘飞; 陈智; Nataliia Hrabchenko; 张文娟; 于江^*; 吴家强^*

来源：山东农业科学, 2023, 55(10): 140-145.

DOI：10.14083/j.issn.1001-4942.2023.10.019

• 非洲猪瘟病毒
• p22蛋白
• 单克隆抗体
• 原核表达

非洲猪瘟(African swine fever, ASF)是由非洲猪瘟病毒(African swine fever virus, ASFV)引起的一种高度传染性病毒性疾病，发病率和死亡率高达100%,对我国的生猪养殖业造成了毁灭性打击。p22蛋白为ASFV的结构蛋白，本研究构建了重组原核表达质粒pET-32a-p22,将其转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞表达重组p22蛋白并纯化，经Western blot鉴定证实重组p22蛋白与ASFV阳性血清有良好的免疫反应性。利用重组p22蛋白免疫Balb/c小鼠并通过间接ELISA方法筛选到2株能够稳定分泌p22蛋白单克隆抗体(MAb)的杂交瘤细胞株2D6和5E7。经抗体亚型鉴定两株抗体均为IgG1型；经Western blot鉴定，两株抗体能够特异性识别过表达的p22蛋白。综上，本研究成功表达并纯化了p22重组蛋白，制备了p22单克隆抗体，为进一步探讨p22蛋白的结构功能及其在ASFV中的感染致病机制提供了基础条件。

• 单位
  山东省农业科学院; 青岛农业大学