氧化环境下 PSMB5基因对人晶状体上皮细胞的保护作用

作者：张铁英; 张玉贤; 王静

来源：中华眼视光学与视觉科学杂志, 2023, 25(03): 195-200.

DOI：10.3760/cma.j.cn115909-20220916-00361

• 蛋白酶体
• 蛋白酶体β5亚单位
• 晶状体
• 高表达
• 氧化
• 保护

目的: 研究氧化环境下高表达蛋白酶体β5亚单位(PSMB5)对人晶状体上皮细胞的保护作用。方法: 实验研究。建立稳定过表达PSMB5的人晶状体上皮细胞株(实验组), 以空白载体转染细胞株为对照组。通过Western blot法分别检测2组细胞内PSMB5、蛋白酶体β2亚单位(PSMB7)和蛋白酶体β1亚单位(PSMB6)蛋白表达情况;人工合成的多肽Suc-Leu-Leu-Val-Tyr-AMC(LLVY)、Boc-Bal-Gly-Arg-AMC(VGR)及Z-Leu-Leu-Glu-βNA(LLE)分别检测2组细胞内PSMB5、PSMB7和PSMB6蛋白活性的变化;并将2组细胞置于40 μmol/L H2O2环境下, 观察细胞增殖能力的变化及细胞内羰基化蛋白含量改变的情况。数据采用独立样本t检验进行比较。结果: 转染PSMB5的实验组人晶状体上皮细胞株内PSMB5蛋白的表达量较对照组高, 同时PSMB6和PSMB7蛋白的表达量也相对高;而相应蛋白酶体亚单位的蛋白酶活性也显著增加。在40 μmol/L H2O2环境下处理4 h后, 对照组和实验组细胞的增殖能力均受到抑制, 2组细胞的增殖率分别为(6.99±3.43)%和(72.47±5.56)%, 但对照组细胞的增殖能力受到抑制的程度明显高于实验组, 2组之间的差异有统计学意义(t=22.41, P<0.001)。经过相同处理后, 对照组和实验组细胞内羟基化蛋白含量分别为(2.65±0.44)nmol/mg和(1.63±0.36)nmol/mg, 均高于处理前[分别为(0.41±0.10)nmol/mg和(0.45±0.12)nmol/mg], 但是实验组细胞内氧化蛋白含量明显低于对照组细胞内氧化蛋白的含量, 差异具有统计学意义(t=4.01, P=0.008)。结论: 氧化环境下, 高表达PSMB5基因提高了人晶状体上皮细胞内蛋白酶体的活性及抗氧化能力, 具有保护作用。

• 单位
  南方医科大学